哺乳动物细胞表达能够实现对蛋白的复杂修饰,促进蛋白准确折叠,表达的蛋白更接近天然状态。已被广泛的运用到疫苗研发,抗体生产等领域。本专题主要介绍了利用哺乳动物细胞表达系统表达蛋白相关的内容,包括细胞的传代培养、瞬时转染、稳定转染、瞬时转染与稳定转染区别等。
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本文主要对哺乳动物蛋白表达常用的HEK293细胞及CHO细胞传代培养的基本原则、实验步骤及注意事项进行介绍。
本文主要介绍了常见的细胞转染方法,例如脂质体转染法、病毒转染法、电穿孔法、阳离子聚合物介导法等。
瞬时转染与稳定转染是两种常见的哺乳动物表达系统生产蛋白的方式,本文分别对瞬时转染及细胞稳定转染的实验流程做一介绍。
在对细胞进行转染时,转染试剂、转染方法、细胞状态等都会影响到胞转染的效率,本文主要对影响细胞转染效率的因素做一介绍。
想要获得稳定表达的细胞株,需要对转染后得到的细胞池进行筛选。本文主要对细胞池的筛选原理、筛选系统及单克隆细胞株的筛选策略做一介绍。
主要介绍了细胞培养实验中常见的问题,及解决方案。如细胞污染、化学污染、微生物污染等。
细胞生长曲线的绘制方法多种,本文主要介绍通过细胞计数法绘制生长曲线。
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